液相色谱中色谱峰拖尾的原因
液相色谱分析中色谱峰拖尾的原因一般有:色谱柱被污染、柱外死体积、样品过载、样品溶剂过强、组分共流出、流动相pH值在样品pKa附近和层析柱柱效不高等。
一、色谱柱被污染:
如果色谱柱开始使用时峰形正常,使用一段时间后逐渐出现峰拖尾,则色谱柱被污染的可能性很大。这时需要对色谱柱加强冲洗,即使用比方法流动相更强的溶剂冲洗色谱柱。
建议做好样品前处理,但如果前处理后依然比较脏,强烈建议配置保护柱。一旦峰形变差,柱效下降,应及时更换保护柱芯。
二、柱外死体积:
较大的柱外死体积会导致峰形展宽和峰拖尾,建议仔细检查样品经过的所有管路和各连接部位,使用合适的管线和接头。
三、样品过载:
减小进样体积或稀释样品。
四、样品溶剂过强:
样品溶剂强度应不高于流动相洗脱强度。使用流动相溶解样品或使用比初始比例流动相洗脱能力更弱的溶剂溶解样品。
五、组分共流出:
如果一小峰包含在一大峰的后面,需要做好色谱条件的优化,有条件时可利用PDAD检查峰纯度。
六、流动相pH值在样品pKa附近:
流动相pH值在样品pKa附近时,样品解离平衡不充分,容易出现前沿峰或拖尾峰,所以流动相pH值应尽量选在样品pKa±1.5以外。
七、层析柱柱效不好:
当色谱柱柱效不高时,需要想办法提高柱效。
当色谱柱柱效不高时,需要想办法提高柱效。